生物素-亲和素简单介绍

生物素-亲和素简单介绍

生物素－亲和素系统（Biotin-Avidin System，以下简称BAS）是半个世纪前发现的一种新型生物反应放大系统。生物素与亲和素之间高亲合力的牢固结合，使BAS免疫标记和有关示踪分析更加灵敏，生物素－亲和素系统目前已广泛用于抗原、抗体的定性、定量检测及定位观察研究。

        生物素（D-biotin）分子结构见图，分子量244.31Da．生物素分子有两个环状结构（如图1），其中咪唑酮环是与亲和素结合的主要部位；噻吩环，C2上有一戊酸侧链，其末端羧基是结合抗体和其他生物大分子的惟一结构，经化学修饰后，生物素可成为带有多种活性基团的衍生物——活化生物素（如图2）

亲和素（avidin，AV）亦称抗生物素蛋白、卵白素，是从卵白蛋白中提取的一种由4个相同亚基组成的碱性糖蛋白，分子量为68kD。4个相同的亚基使每个亲和素能最多可结合4个分子的生物素。生物素与亲和素之间具有极强的亲和力，比抗原与抗体间的亲和力高得多。并且，二者的结合稳定性好、专一性强。

生物素－亲和素系统有哪些优点：

灵敏度
        生物素易与蛋白质、核酸类及其他生物大分子结合，形成的生物素衍生物，不仅保持了大分子物质的原有生物活性，而且具有多价性。此外，每个亲和素分子有四个生物素结合部位，可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标记物。因此，BAS具有多级放大作用，使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。


特异性
        亲和素与生物素间的结合呈高度特异性。因此，BAS的多层次放大作用在提高灵敏度的同时，并不增加非特异性干扰。而且，BAS结合特性不会因反应试剂的高度稀释而受影响。因此，在实际应用中可**限度地降低反应试剂的非特异作用。


稳定性
        亲和素结合生物素的亲和常数可为抗原-抗体反应的百万倍，二者结合形成复合物的解离常数很小，呈不可逆反应性；而且酸、碱、变性剂、蛋白水解酶以及有机溶剂均不影响其结合。因此，BAS在实际应用中，产物的稳定性高，从而可降低操作误差，提高测定的精确度。


适用性
        生物素及亲和素可形成各种各样的衍生物。这些衍生物可通过标记物（如酶、荧光素或放射性元素）用于一系列检测和分离纯化，包括细胞、组织、体液中的抗原-抗体、激素-受体、核酸系统等。同时一些已上市的基于BAS的试剂也为临床诊断和科研提供了便利。

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